原代细胞在转染小分子RNA和DNA（如siRNA、antisense RNA、microRNA等）方面表现出色，其转染能力涵盖了绝大多数原代细胞。当前，无论国内外，原代细胞的核酸转染仍是研究中的热点和难题，市场上缺乏真正高效的商品化原代细胞核酸转染试剂。然而，通过选择合适的转染试剂，原代细胞依然能够实现良好的基因敲除效果，甚至对某些活体寄生虫幼虫也能获得理想的转染结果。

在大多数原代细胞的转染实验中，使用环亚集团·AG88的RFectPM细胞转染试剂，细胞转染阳性率超过80%，而转染过程中细胞的死亡率则低于10%。

原代细胞的分离与培养步骤

原代细胞的分离和培养可以按照以下基本步骤进行：

1. 器官和组织选择

尽可能去除不必要的组织和血迹，以提高细胞的分离效率。

2. 原代细胞的分离

（1）使用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III进行细胞分离。

（2）根据不同的组织来源选择相应的PriCells原代细胞分离试剂盒。

3. 原代细胞的培养

（1）使用环亚集团·AG88的PriCells原代细胞特制培养基。

（2）添加PriCells原代细胞特制添加物和优质胎牛血清。

4. 细胞的培养和鉴定

使用PriCells原代细胞鉴定试剂盒进行细胞的鉴定。

5. 原代细胞的传代与保存

（1）传代：根据细胞生长状态将细胞以1:2或1:3的比例进行传代。

（2）保存：使用DMSO与培养液及血清按以下顺序降温：室温→4℃（20分钟）→冰箱冷冻室（30分钟）→超低温冰箱（－80℃过夜）→液氮。

6. 原代细胞的复苏

（1）将细胞取出，迅速放入37℃的温水中进行快速解冻。

（2）吸出细胞悬液后，加入10倍以上的培养液进行稀释。

（3）适当稀释后，将细胞接种于培养瓶中，放入37℃ CO2培养箱中静置培养。

通过以上步骤，结合环亚集团·AG88系列产品，您能有效获得高质量的原代细胞，为后续的科研和应用打下坚实基础。